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021-54845833/15800441009
產品簡介
產品名稱 ： 大鼠精原干細胞
產品品牌 ： 通蔚生物
組織來源 ： 睪丸組織
產品規格 ： 5×105cells/T 25細胞培養瓶
細胞簡介
大鼠精原干細胞分離自睪丸組織；精原干細胞是位于睪丸生精小管的生精上皮內的一群生精干細胞，是成體內的定向干細胞。精原干細胞的一些獨特優勢使其成為動物轉基因的理想宿主細胞。精原干細胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多項生命活動的調節機制的深入研究，精子發生機理的進一步闡明以及精原干細胞轉染，異體、異種移植技術的實際應用，都迫切需要找到一種可行的方法將其分離純化，以期得到較高產量和純度的有活力的精原細胞用于體外培養。在哺乳動睪丸內，精子發生時一個受高度調控和持續的過程，精原干細胞(SSC s)一方面進行自我更新維持干細胞數量，另一方面又不斷執行分化成各級生精細胞直至最后生成精子。
精原干細胞定居在曲精細管上皮的基膜處，是哺乳動物精子發生的最原始細胞，也是動物體內一起能將遺傳信息傳遞的干細胞。精原干細胞體外培養體系的建立，在生物學、醫學、畜牧業生產及制備轉基因動物等領域具有廣闊的應用前景。精原干細胞(SSC s)是生精上皮近基底膜的一群細胞，具有自我更新能力和多向分化潛能，是哺乳動物體內唯一能將遺傳信息傳遞給下一代的成體干細胞。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的大鼠精原干細胞采用先機械吹打、后胰蛋白酶消化，結合P ercoll密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的大鼠精原干細胞經c-kit免疫熒光鑒定，純度可達90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
培 養 基 ：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：貼壁
細胞形態 ：梭形、圓形
傳代特性 ：可傳1-2代
傳代比例 ：1:2
消 化 液 ：0.25% 胰蛋白酶
培養條件 ：氣相：空氣，95% ；C O2，5%
大鼠精原干細胞體外培養周期有限；建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
大鼠精原干細胞是一種貼壁細胞，細胞形態呈梭形、圓形，在通蔚生物技術部標準操作流程下，細胞可傳1-2代；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T 25細胞培養瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5m L，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞完全貼壁后，培養觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1m g/m l），明膠（0.1% ），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
