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產(chǎn)品中心

  • 小鼠神經(jīng)干細(xì)胞

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    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號(hào) : TW33605
    • 應(yīng)用 : 僅供科研使用
    • 保存條件 : 低溫保存
    • 貨期 : 現(xiàn)貨
    • 商品庫(kù)存:100
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
產(chǎn)品名稱 :小鼠神經(jīng)干細(xì)胞
產(chǎn)品品牌 :通蔚生物
組織來源 :腦組織
產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞簡(jiǎn)介
小鼠神經(jīng)干細(xì)胞分離自腦皮層組織。大腦分左右兩個(gè)半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì)) 覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。
每一個(gè)半球都有三個(gè)面,即外側(cè)面(約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3) 、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積) 。半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積。大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。
由于三溝裂之界隔,使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。神經(jīng)干細(xì)胞具有分化為神經(jīng)神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞的能力,能自我更新,并足以提供大量腦組織細(xì)胞的細(xì)胞群。
神經(jīng)干細(xì)胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細(xì)胞,它可以通過不對(duì)等的分裂方式產(chǎn)生神經(jīng)組織的各類細(xì)胞。

需要強(qiáng)調(diào)的是,在腦脊髓等所有神經(jīng)組織中,不同的神經(jīng)干細(xì)胞類型產(chǎn)生的子代細(xì)胞種類不同,分布也不同。神經(jīng)干細(xì)胞作為干細(xì)胞的一種,它具有其它所有干細(xì)胞的基本特征 :具有自我維持和自我更新能力,具有多種分化潛能,具有分化為本系統(tǒng)大部分類型細(xì)胞的能力,這種自我更新和分化潛能可以維持相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間甚至終生,對(duì)損傷和疾病具有反應(yīng)能力。
神經(jīng)干細(xì)胞在疾病、損傷狀態(tài)下具有增殖、遷移,并向神經(jīng)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞分化的能力,已成為神經(jīng)系統(tǒng)損傷修復(fù)和再生研究的熱點(diǎn),體外建立穩(wěn)定的神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)模型是其基礎(chǔ)和臨床應(yīng)用的前提。
神經(jīng)干細(xì)胞在培養(yǎng)3-4d后,可形成神經(jīng)球,神經(jīng)球在培養(yǎng)基中呈懸浮生長(zhǎng),予以更換半量培基,1周后用吸管輕柔吹打球形克隆成為小的神經(jīng)球和單細(xì)胞懸液,將部分細(xì)胞接種到新的培養(yǎng)瓶中,2×105個(gè)細(xì)胞/瓶,每7-10d傳代1次,每隔3d離心更換半量培養(yǎng)基1次,培養(yǎng)條件不變。

方法簡(jiǎn)介
通蔚生物實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠神經(jīng)干細(xì)胞采用胰蛋白酶消化后差速貼壁,結(jié)合神經(jīng)干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,總量約為5×105cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)
通蔚生物實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠神經(jīng)干細(xì)胞經(jīng)N estin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息
培 養(yǎng)  基 :含B-27 Supplem ent、EG F、bFG F、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 :懸浮
細(xì)胞形態(tài) :球形
傳代特性 :可傳2-3代
傳代比例 :1:2
消 化  液 :0. 25% 胰蛋白酶,A ccutase
培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%
小鼠神經(jīng)干細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片

使用方法
小鼠神經(jīng)干細(xì)胞是一種懸浮細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)呈球形,在通蔚生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,細(xì)胞可傳2-3代。建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 懸浮細(xì)胞處理
1) 收集T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基至50ml離心管中,用PBS清洗細(xì)胞培養(yǎng)瓶1-2次,收集清洗液。
2) 1200rpm 離心3min,棄上清,收集細(xì)胞沉淀。
3-1) 添 加 0. 25% 胰蛋白酶消化液2m L至離心管中,用吸管輕輕吹打混勻,37℃溫浴2-3min。
消化結(jié)束后,加入胰酶抑制劑(避免使用血清) 終止消化,用吸管輕輕吹打,分散神經(jīng)干細(xì)胞球。
3-2) 建議使用A ccutaseT M 消化液,添加消化液1m L至離心管中,用吸管輕輕吹打混勻,37℃溫浴5-8min。消化結(jié)束后,無需終止,用吸管輕輕吹打,分散神經(jīng)干細(xì)胞球。
3-3) 若神經(jīng)干細(xì)胞球較小,可加入2ml完全培養(yǎng)基,直接用吸管輕輕吹打,分散神經(jīng)干細(xì)胞球。
4) 1200rpm 離心5min,棄上清,收集細(xì)胞沉淀。加入5ml新鮮完全培養(yǎng)基,用吸管輕輕吹打混勻。按傳代比例進(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
5)待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,培養(yǎng)觀察。之后按換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請(qǐng)注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和通蔚生物技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

特殊注意事項(xiàng)
5. 此細(xì)胞為懸浮細(xì)胞,請(qǐng)注意不要直接倒掉,造成損失。神經(jīng)干細(xì)胞懸浮時(shí)聚集成球生長(zhǎng),
因運(yùn)輸會(huì)形成較大球體團(tuán)塊,需要消化分散處理。依據(jù)培養(yǎng)器皿的吸附效果,神經(jīng)干細(xì)胞可能出現(xiàn)貼壁生長(zhǎng)狀態(tài),可正常培養(yǎng)。

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