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產(chǎn)品中心

  • 人陰道平滑肌細胞

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    價格:
    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號 : TW33563
    • 應用 : 僅供科研使用
    • 保存條件 : 低溫保存
    • 貨期 : 現(xiàn)貨
    • 商品庫存:100
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產(chǎn)品簡介
產(chǎn)品名稱 :人陰道平滑肌細胞
產(chǎn)品品牌 :通蔚生物
組織來源 :陰道組織
產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T 25細胞培養(yǎng)瓶

細胞簡介
人陰道平滑肌細胞分離自陰道組織。陰道位于膀胱、尿道和直腸之間,是一個富有彈性的管狀器官。它在人類生殖過程中具有多種生理功能,是連接子宮與外陰的通道,是排出月經(jīng)血、娩出嬰兒的必經(jīng)之路,也是一個重要的性交器官。陰道壁按組織學由外到內(nèi)分三層,即黏膜層、肌層和外膜。平滑肌,是非橫紋肌的肌肉組織。分布在人體動脈和靜脈血管壁、膀胱、子宮、男性和女性生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫狀肌和虹膜。

陰道平滑肌分離自陰道壁肌層組織,平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中。2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏。細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀。密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。

方法簡介
通蔚生物實驗室分離的人陰道平滑肌細胞采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。

質(zhì)量檢測
通蔚生物實驗室分離的人陰道平滑肌細胞經(jīng)α-SM A 免疫熒光鑒定,純度可達90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息
培 養(yǎng)  基 :含F(xiàn)BS、EG F、bFG F、Insulin、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁 
細胞形態(tài) :成纖維細胞樣
傳代特性 :可傳3-5代左右
傳代比例 :1:2
消 化  液 :0. 25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 :氣相:空氣,95% 。C O2,5%
人陰道平滑肌細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

使用方法
人陰道平滑肌細胞是一種貼壁細胞,細胞形態(tài)呈成纖維細胞樣,在通蔚生物技術(shù)部標準操作流程下,細胞可傳3-5代左右。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T 25細胞培養(yǎng)瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
2)添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化。
3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至
5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4)待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 復蘇操作說明
1. 準備好37度水浴鍋,預熱至37度。
2. 準備好T25培養(yǎng)瓶,加入10ml完全培養(yǎng)基(培養(yǎng)基量必須大于凍存液10倍體積)。
3. 取出干冰內(nèi)凍存細胞管,用EP手套包裹凍存管(防止管內(nèi)進水導致污染),迅速放于水
浴鍋內(nèi),于1min內(nèi)融化完全。
4. 取出凍存管,酒精噴灑消毒后擦干,置于超凈臺內(nèi)。
5. 吸取凍存管內(nèi)細胞懸液,加入步驟2中準備好的T25培養(yǎng)瓶內(nèi),8字緩慢搖勻。
6. 培養(yǎng)瓶放于37度C O 2恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),靜置培養(yǎng)24h,更換新鮮換培養(yǎng)基(注意貼壁細胞、懸浮細胞不同換液操作方法)。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0. 1m g/m l),明膠(0. 1% ),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和通蔚生物技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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