人毛囊干細胞
產品簡介
產品名稱 : 人毛囊干細胞
產品品牌 : 通蔚生物
組織來源 : 毛囊組織
產品規格 : 5×105cells/T 25細胞培養瓶
細胞簡介
人毛囊干細胞分離自皮膚毛囊組織;毛囊是表皮細胞連續形成的袋樣上皮。其基底是真皮凹進的真皮毛乳頭,中心是一根毛發,立毛肌的一側斜附在毛囊壁上,附著點的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸,毛囊在皮膚表面的開口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下組織中,毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度,它是由包繞毛發與表皮相連的上皮鞘,以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個結構比較復雜的器官附件組織。
毛囊干細胞是在人的毛囊外根鞘隆突部中的一種細胞。毛囊干細胞屬于成體干細胞,在體內處于靜止狀態,在體外培養作用下表現出驚人的增殖能力。研究發現,毛囊干細胞具有多向分化潛能,它可以分化成表皮、毛囊、皮脂腺,參與皮膚創傷愈合的過程。毛囊干細胞和其它成體干細胞一樣,具有慢周期性、未分化性、自我更新和體外增殖能力強等特點。
毛囊干細胞分化經毛囊干細胞(hairfollicle stem cells,FSC )、短暫增殖細胞(transitam plifyingcells,T A C )有絲分裂后分化細胞(postmitoticdifferen tiating cells,PD C )三個階段。毛囊干細胞在光鏡下呈立方形,細胞體積小,核漿比率大,表面光滑,皺褶少,又被稱為非鋸齒形細胞,細胞體積的增大與增殖能力呈負相關。超微結構顯示細胞表面有少許微絨毛,細胞核存在許多卷曲,染色質彌散分布,這些形態特征均表現出原始細胞的特性。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的人毛囊干細胞采用膠原酶-中性蛋白酶聯合消化制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的人毛囊干細胞經C K 19、C D 200免疫熒光鑒定,純度可達90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
培 養 基 : 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 : 每2-3天換液一次
生長特性 : 貼壁
細胞形態 : 梭形、多角形
傳代特性 : 可傳3-5代左右
傳代比例 : 1:2
消 化 液 : 0. 25% 胰蛋白酶
培養條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%
人毛囊干細胞體外培養周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
人毛囊干細胞是一種貼壁細胞,細胞形態呈梭形、多角形,在通蔚生物技術部標準操作流程下,細胞可傳3-5代左右;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1.取出T 25細胞培養瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養。瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞完全貼壁后,培養觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1m g/m l,明膠(0.1% ),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。