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021-54845833/15800441009
產品簡介
產品名稱 ：小鼠皮膚肥大細胞
產品品牌 ：通蔚生物
組織來源 ：皮膚組織
產品規格 ：5×105cells/T 25細胞培養瓶
細胞簡介
小鼠皮膚肥大細胞分離自皮膚組織。皮膚肥大細胞廣泛分布于皮膚微血管周圍，分泌多種細胞因子，參與免疫調節(T 細胞、B細胞、A PC 細胞活化) 。皮膚肥大細胞表達M HC分子、B 7分子，具有A PC 功能。表達大量的IgE -Fc受體，釋放過敏介質。
具有弱吞噬功能，和血液的嗜堿粒細胞同樣，具有強嗜堿性顆粒的組織細胞。存在于血液中的這類顆粒，含有肝素、組織胺、5-羥色胺，由細胞崩解釋放出顆粒以及顆粒中的物質，可在組織內引起速發型過敏反應(炎癥) 。
由于在肥大細胞上結合的IgE抗體和抗原的接觸，使細胞多陷于崩壞。肥大細胞呈圓形或卵圓形，細胞核小，呈圓形或橢圓形，染色淺，位于細胞中央。
細胞常成堆或單個分布于血管附近。細胞呈圓形或卵圓形，細胞質中充滿大小一致、染成藍紫色的顆粒，均勻分布在核周圍。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的小鼠皮膚肥大細胞采用膠原酶-胰蛋白酶混合消化法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的小鼠皮膚肥大細胞經M C G -35免疫熒光鑒定，純度可達90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
培 養 基 ：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：懸浮
細胞形態 ：圓形
傳代特性 ：可傳1-2代
傳代比例 ：1:2
消 化 液 ：0. 25% 胰蛋白酶
培養條件 ：氣相 ：空氣，95% 。C O2，5%
小鼠皮膚肥大細胞體外培養周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
小鼠皮膚肥大細胞是一種懸浮細胞，細胞形態呈圓形，在通蔚生物技術部標準操作流程下，細胞可傳1-2代。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T 25細胞培養瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2. 懸浮細胞處理
1) 收集T25細胞培養瓶中的培養基至50ml離心管中，用PBS清洗細胞培養瓶1-2次，收集清洗液。
2) 1200-1500rpm 離心3min，棄上清，收集細胞沉淀。
3) 加入5ml新鮮完全培養基，用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞。將分散好的細胞調整合適
密度接種至培養器皿中，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 若遇到懸浮細胞團塊較大，無法機械吹散時，向步驟2) 中細胞沉淀添加0. 25% 胰蛋白酶消化液2m L至離心管中，用吸-管輕輕吹打混勻，37℃溫浴2-3min，消化結束后，加入胰酶抑制劑(或血清) 終止消化，用吸管輕輕吹打，分散細胞。1200rpm 離心5min，棄上清，收集細胞沉淀。
5) 加入5ml新鮮完全培養基，用吸管輕輕吹打混勻。按傳代比例進行接種傳代，然后補充
新鮮的完全培養基至5m L，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
6)待細胞狀態穩定后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
特殊注意事項
5. 此細胞為懸浮細胞，請注意不要直接倒掉，造成損失。懸浮細胞因多數胞體較小，離心收集時，請注意懸液中細胞是否收集完全，可適當加大離心轉速200轉或增加離心時間3-5m in，增加細胞獲取量。
