人外周血淋巴細胞
產品簡介
產品名稱 : 人外周血淋巴細胞
產品品牌 : 通蔚生物
組織來源 : 血液組織
產品規格 : 5×105cells/T 25細胞培養瓶
細胞簡介
人外周血淋巴細胞分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中首次提出外周血這一新概念。淋巴細胞(lym phocyte)是白細胞的一種,是體積最小的白細胞。其由淋巴器官產生,主要存在于淋巴管中循環的淋巴液中,是機體免疫應答功能的重要細胞成分,是淋巴系統幾乎全部免疫功能的主要執行者,是對抗外界感染和監控體內細胞變異的一線“士兵”。
淋巴細胞是一類具有免疫識別功能的細胞系,按其發生遷移、表面分子和功能的不同,可分為T 淋巴細胞(又名T 細胞)、B淋巴細胞(又名B細胞)和自然殺傷(N K )細胞。T細胞和B細胞都是抗原特異性淋巴細胞,它們的最初來源是相同的,都來自造血組織。T淋巴細胞隨血循環到胸腺,在胸腺激素等的作用下成熟,而B細胞在骨髓中分化成熟。當受抗原刺激后,T淋巴細胞即轉化為淋巴母細胞,再分化為致敏T淋巴細胞,參與細胞免疫,其免疫功能主要是抗胞內感染、瘤細胞與異體細胞等。
而B淋巴細胞是先轉化為漿母細胞,再分化為漿細胞,產生并分泌免疫球蛋白(抗體),參與體液免疫,其功能是產生抗體,提呈抗原,以及分泌細胞內因子參與免疫調節;N K 細胞不依賴抗原刺激而自發地發揮細胞毒效應,具有殺傷靶細胞的作用。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的人外周血淋巴細胞采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶 。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的人外周血淋巴細胞經過檢測,純度可達90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
培 養 基 : 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 : 每2-3天換液一次
生長特性 : 懸浮
細胞形態 : 圓形
傳代特性 : 不增殖;不傳代
傳代比例 : 不傳代
消 化 液 : 0.25% 胰蛋白酶
培養條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%
人外周血淋巴細胞體外培養周期有限;建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
人外周血淋巴細胞是一種懸浮細胞,細胞形態呈圓形,在通蔚生物技術部標準操作流程下,細胞不增殖;不傳代;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1.取出T 25細胞培養瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2.懸浮細胞處理
1) 收集T25細胞培養瓶中的培養基至50ml離心管中,用PBS清洗細胞培養瓶1-2次,收集清洗液;
2) 1200-1500rpm 離心3min,棄上清,收集細胞沉淀。
3) 加入5ml新鮮完全培養基,用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞;將分散好的細胞調整合適密度接種至培養器皿中,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 若遇到懸浮細胞團塊較大,無法機械吹散時,向步驟2)中細胞沉淀添加0.25% 胰蛋白酶消化液2m L至離心管中,用吸-管輕輕吹打混勻,37℃溫浴2-3min,消化結束后,加入胰酶抑制劑(或血清)終止消化,用吸管輕輕吹打,分散細胞;1200rpm 離心5min,棄上清,收集細胞沉淀。
5) 加入5ml新鮮完全培養基,用吸管輕輕吹打混勻;按傳代比例進行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
6) 待細胞狀態穩定后,培養觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。