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  • 小鼠膀胱成纖維細胞

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    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號 : TW33454
    • 應用 : 僅供科研使用
    • 保存條件 : 低溫保存
    • 貨期 : 現貨
    • 商品庫存:100
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產品簡介
產品名稱 :小鼠膀胱成纖維細胞
產品品牌 :通蔚生物
組織來源 :膀胱組織
產品規格 :5×105cells/T 25細胞培養瓶

細胞簡介
小鼠膀胱成纖維細胞分離自膀胱組織。膀胱是一個儲尿器官,在哺乳類動物,它是由平滑肌組成的一個囊形結構,位于骨盆內,其后端開口與尿道相通。
膀胱與尿道的交界處有括約肌,可以控制尿液的排出。膀胱壁由三層組織組成,由內向外為黏膜層、肌層和外膜。
肌層由平滑肌纖維構成,稱為逼尿肌,逼尿肌收縮,可使膀胱內壓升高,壓迫尿液由尿道排出。在膀胱與尿道交界處有較厚的環形肌,形成尿道內括約肌。
在括約肌收縮能關閉尿道內口,防止尿液自膀胱漏出。膀胱壁分為三層 :即漿膜層(蜂窩脂肪組織) 、肌肉層(逼尿肌、膀胱三角區肌) 和黏膜層(極薄的一層移行上皮組織) 。

成纖維細胞(Fibroblast) 是 疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。
成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化。成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。
剛分離的膀胱成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起。

6h后細胞基本貼壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團。細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。
細胞融合,并彼此連接成網狀。細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。膀胱成纖維細胞分泌的生長因子是一種具有多功能的促有絲分裂原,研究已表明其參與惡性腫瘤的形成過程。近年來,堿性成纖維細胞生長因子在膀胱癌發病過程中的作用、與生物學行為之間的關系以及治療上的應用已受到重視。

方法簡介
通蔚生物實驗室分離的小鼠膀胱成纖維細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。

質量檢測
通蔚生物實驗室分離的小鼠膀胱成纖維細胞經Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息
培 養  基 :含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態 :成纖維細胞樣
傳代特性 :可傳3代左右
傳代比例 :1:2
消 化  液 :0. 25% 胰蛋白酶
培養條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%
小鼠膀胱成纖維細胞體外培養周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。

細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片

使用方法
小鼠膀胱成纖維細胞是一種貼壁細胞,細胞形態呈成纖維細胞樣,在通蔚生物技術部標準操作流程下,細胞可傳3代左右。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T 25細胞培養瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞完全貼壁后,培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0. 1m g/m l),明膠(0. 1% ),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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