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產(chǎn)品中心

  • 小鼠氣管上皮細(xì)胞

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    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號(hào) : TW33347
    • 應(yīng)用 : 僅供科研使用
    • 保存條件 : 低溫保存
    • 貨期 : 現(xiàn)貨
    • 商品庫(kù)存:100
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
產(chǎn)品名稱 :小鼠氣管上皮細(xì)胞
產(chǎn)品品牌 :通蔚生物
組織來源 :氣管
產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞簡(jiǎn)介
小鼠氣管上皮細(xì)胞分離自氣管組織。氣管(T rachea) ,呼吸器官的一部分。為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣,與環(huán)狀軟骨相連。
向下至第四、五胸椎體(相當(dāng)胸骨角平面) 交界處,分左、右主支氣管,分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個(gè)半環(huán)狀軟骨構(gòu)成,有彈性,軟骨為“C”字形的軟骨環(huán),缺口向后,各軟骨環(huán)以韌帶連接起來,環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接,保持了持續(xù)張開狀態(tài)。管腔襯以粘膜,表面覆蓋纖毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,纖毛不斷向咽部擺動(dòng)將粘液與灰塵排出,以凈化吸入的氣體。

氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的第一道防線,不僅是各種病原體、炎癥介質(zhì)作用的靶細(xì)胞,還作為效應(yīng)細(xì)胞合成、釋放多種炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子從而參與氣道炎癥及免疫反應(yīng)。
體外培養(yǎng)的原代氣管上皮細(xì)胞因與體內(nèi)組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上存在很大的相似性,因此,在基礎(chǔ)及臨床研究中極為重要。

方法簡(jiǎn)介
通蔚生物實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠氣管上皮細(xì)胞采用鏈霉蛋白酶-中性蛋白酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)
通蔚生物實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠氣管上皮細(xì)胞經(jīng)PC K 免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息
包被條件 :鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm 2) 
培 養(yǎng)  基 :含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 :貼壁 
細(xì)胞形態(tài) :上皮細(xì)胞樣 
傳代特性 :可傳1-2代 
傳代比例 :1:2
消 化  液 :0. 25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%
小鼠氣管上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片

使用方法
小鼠氣管上皮細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)呈上皮細(xì)胞樣,在通蔚生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,細(xì)胞可傳1-2代。建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn)。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0. 1m g/m l),明膠(0. 1% ),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。

注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請(qǐng)注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和通蔚生物技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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