產(chǎn)品簡(jiǎn)介
產(chǎn)品名稱 :大鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞
產(chǎn)品品牌 :通蔚生物
組織來源 :淋巴結(jié)
產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
細(xì)胞簡(jiǎn)介
大鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞分離自淋巴結(jié)。淋巴結(jié)是哺乳類特有的周圍淋巴器官,由淋巴細(xì)胞集合而成。呈豆形,位于淋巴管行進(jìn)途中,是產(chǎn)生免疫應(yīng)答的重要器官之一。淋巴結(jié)表面包有被膜,被膜的結(jié)締組織伸入淋巴結(jié)內(nèi)形成小梁,構(gòu)成淋巴結(jié)的支架。被膜下為皮質(zhì)區(qū),淋巴結(jié)的中心及門部為髓質(zhì)區(qū)。皮質(zhì)區(qū)有淋巴小結(jié)、彌散淋巴組織和皮質(zhì)淋巴竇(簡(jiǎn)稱皮竇) ,髓質(zhì)包括由致密淋巴組織構(gòu)成的髓索和髓質(zhì)淋巴竇(簡(jiǎn)稱髓竇) 。
淋巴竇的竇腔內(nèi)有許多淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,從輸入淋巴管流來的淋巴液先進(jìn)入皮竇再流向髓竇,最后經(jīng)輸出淋巴管離開淋巴結(jié)。淋巴結(jié)的主要功能是濾過淋巴液,產(chǎn)生淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞,參與機(jī)體的免疫反應(yīng)。淋巴結(jié)腫大或疼痛常表示其屬區(qū)范圍內(nèi)的器官有炎癥或其他病變。主要功能是濾過淋巴液,產(chǎn)生淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞,參與機(jī)體的免疫反應(yīng)。當(dāng)局部感染時(shí),細(xì)菌、病毒或癌細(xì)胞等可沿淋巴管侵入,引起局部淋巴結(jié)腫大。如該淋巴結(jié)不能阻止和消滅它們,則病變可沿淋巴管的流注方向擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移。淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞是白細(xì)胞的一種,由次級(jí)淋巴器官淋巴結(jié)產(chǎn)生,是機(jī)體免疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分。細(xì)胞為圓形細(xì)胞核,細(xì)胞質(zhì)少。成熟淋巴細(xì)胞需依賴抗原刺激而分化增殖,繼而發(fā)揮其免疫功能。
方法簡(jiǎn)介
通蔚生物實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞采用分離淋巴結(jié)組織、研磨獲取單細(xì)胞懸液后通過密度梯度離心法制備而來,細(xì)胞總量約為1×10cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
通蔚生物實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞經(jīng)過檢測(cè),且不含有HIV-1、HBV、HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
培 養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、P enicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每 2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 :懸浮
細(xì)胞形態(tài) :圓形
傳代特性 :不增殖。不傳代
傳代比例 :不傳代
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%
大鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
使用方法
大鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞是一種懸浮細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)呈圓形,在通蔚生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,細(xì)胞不增殖。不傳代。建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 懸浮細(xì)胞處理
1) 收集T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基至50ml離心管中,用PBS清洗細(xì)胞培養(yǎng)瓶1-2次,收集清洗液。
2) 1200-1500rpm 離心3min,棄上清,收集細(xì)胞沉淀。
3) 加入5ml新鮮完全培養(yǎng)基,用吸管輕輕吹打混勻、分散細(xì)胞。將分散好的細(xì)胞調(diào)整合適密度接種至培養(yǎng)器皿中,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 若遇到懸浮細(xì)胞團(tuán)塊較大,無法機(jī)械吹散時(shí),向步驟2) 中細(xì)胞沉淀添加0. 25% 胰蛋白酶消化液2m L至離心管中,用吸-管輕輕吹打混勻,37℃溫浴2-3min,消化結(jié)束后,加入胰酶抑制劑(或血清) 終止消化,用吸管輕輕吹打,分散細(xì)胞。1200rpm 離心5min,棄上清,收集細(xì)胞沉淀。
5) 加入5ml新鮮完全培養(yǎng)基,用吸管輕輕吹打混勻。按傳代比例進(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
6) 待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請(qǐng)注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和通蔚生物技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。