兔晶狀體上皮細胞
產品簡介
產品名稱 :兔晶狀體上皮細胞
產品品牌 :通蔚生物
組織來源 :晶狀體組織
產品規格 :5×105cells/T 25細胞培養瓶
細胞簡介
兔晶狀體上皮細胞分離自晶狀體組織。晶狀體源自胚胎發育外胚層,僅含有上皮細胞及其產物,晶狀體囊膜作為屏障將晶狀體與其它類型細胞完全分開。因而,晶狀體上皮細胞培養既無神經和血管組織的干擾,又不受其它類型細胞如成纖維細胞的污染,保證了培養中細胞成分的單一性。
晶狀體上皮細胞主要負責調節晶狀體的生理平衡,包括電解質和液體的輸送。在正常的發育過程中,晶狀體上皮細胞分化和成熟,然后遷移到晶狀體內部,產生晶體蛋白,自身也拉長而變成晶狀體纖維細胞,并最終失去細胞核和其它的細胞器。
研究表明,晶狀體上皮細胞的分化和極化受到了眼部液體中的生長因子的調控,包括表皮生長因子和胰島素等。細胞貼壁后為扁平不規則多角形,呈單層生長、連成膜狀。
晶狀體上皮細胞是緊密貼附于晶狀體前囊內表面的單層上皮細胞,其異常增殖和分化與白內障和后囊混濁的發生密切相關,體外培養是研究其生長規律的主要手段。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的兔晶狀體上皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的兔晶狀體上皮細胞經BFSP2(晶狀體蛋白) 免疫熒光鑒定,純度可達90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
包被條件 :鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm 2)
培 養 基 :含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態 :上皮細胞樣
傳代特性 :可傳2-3代
傳代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白酶
培養條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%
兔晶狀體上皮細胞體外培養周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
兔晶狀體上皮細胞是一種貼壁細胞,細胞形態呈上皮細胞樣,在通蔚生物技術部標準操作流程下,細胞可傳2-3代。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T 25細胞培養瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞完全貼壁后,培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0. 1m g/m l),明膠(0. 1% ),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。