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產品簡介
產品名稱 ：大鼠神經干細胞
產品品牌 ：通蔚生物
組織來源 ：腦組織
產品規格 ：5×105cells/T 25細胞培養瓶
細胞簡介
大鼠神經干細胞分離自腦皮層組織。大腦分左右兩個半球，大腦皮質(灰質) 覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面，即外側面(約占整個皮質面積的1/3) 、內側面和底面(占2/3的面積) 。半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積。大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。
由于三溝裂之界隔，使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。神經干細胞具有分化為神經神經元、星形膠質細胞和少突膠質細胞的能力，能自我更新，并足以提供大量腦組織細胞的細胞群。神經干細胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細胞，它可以通過不對等的分裂方式產生神經組織的各類細胞。需要強調的是，在腦脊髓等所有神經組織中，不同的神經干細胞類型產生的子代細胞種類不同，分布也不同。
神經干細胞作為干細胞的一種，它具有其它所有干細胞的基本特征：具有自我維持和自我更新能力，具有多種分化潛能，具有分化為本系統大部分類型細胞的能力，這種自我更新和分化潛能可以維持相當長的時間甚至終生，對損傷和疾病具有反應能力。神經干細胞在疾病、損傷狀態下具有增殖、遷移，并向神經細胞、星形膠質細胞和少突膠質細胞分化的能力，已成為神經系統損傷修復和再生研究的熱點，體外建立穩定的神經干細胞培養模型是其基礎和臨床應用的前提。
神經干細胞在培養3-4d后，可形成神經球，神經球在培養基中呈懸浮生長，予以更換半量培基，1周后用吸管輕柔吹打球形克隆成為小的神經球和單細胞懸液，將部分細胞接種到新的培養瓶中，2×105個細胞/瓶，每7-10d傳代1次，每隔3d離心更換半量培養基1次，培養條件不變。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的大鼠神經干細胞采用胰蛋白酶消化后差速貼壁，結合神經干細胞專用培養基培養篩選制備而來，總量約為5×105cells/瓶。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的大鼠神經干細胞經N estin免疫熒光鑒定，純度可達90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
培 養 基 ：含B-27 Supplem ent、EG F、bFG F、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：懸浮
細胞形態 ：球形
傳代特性 ：可傳2-3代
傳代比例 ：1:2
消 化 液 ：0. 25% 胰蛋白酶，A ccutase
培養條件 ：氣相 ：空氣，95% 。C O2，5%
大鼠神經干細胞體外培養周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
大鼠神經干細胞是一種懸浮細胞，細胞形態呈球形，在通蔚生物技術部標準操作流程下，細胞可傳2-3代。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T 25細胞培養瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2. 懸浮細胞處理
1) 收集T25細胞培養瓶中的培養基至50ml離心管中，用PBS清洗細胞培養瓶1-2次，收集清洗液。
2) 1200rpm 離心3min，棄上清，收集細胞沉淀。
3-1) 添加 0. 25% 胰蛋白酶消化液2m L至離心管中，用吸管輕輕吹打混勻，37℃溫浴2-3min。消化結束后，加入胰酶抑制劑(避免使用血清) 終止消化，用吸管輕輕吹打，分散神經干細胞球。
3-2) 建議使用A ccutaseT M 消化液，添加消化液1m L至離心管中，用吸管輕輕吹打混勻，37℃溫浴5-8min。消化結束后，無需終止，用吸管輕輕吹打，分散神經干細胞球。
3-3) 若神經干細胞球較小，可加入2ml完全培養基，直接用吸管輕輕吹打，分散神經干細胞球。
4) 1200rpm 離心5min，棄上清，收集細胞沉淀。加入5ml新鮮完全培養基，用吸管輕輕吹打混勻。按傳代比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5m L，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
5) 待細胞狀態穩定后，培養觀察。之后按換液頻率更換新鮮的完全培養基。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
特殊注意事項
5. 此細胞為懸浮細胞，請注意不要直接倒掉，造成損失。神經干細胞懸浮時聚集成球生長，因運輸會形成較大球體團塊，需要消化分散處理。
依據培養器皿的吸附效果，神經干細胞可能出現貼壁生長狀態，可正常培養。
