兔肌腱干細胞
產(chǎn)品簡介
產(chǎn)品名稱 :兔肌腱干細胞
產(chǎn)品品牌 :通蔚生物
組織來源 :肌腱組織
產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T 25細胞培養(yǎng)瓶
細胞簡介
兔肌腱干細胞分離自肌腱組織。肌腱是肌腹兩端的索狀或膜狀致密結締組織,便于肌肉附著和固定。一塊肌肉的肌腱分附在兩塊或兩塊以上的不同骨上,是由于肌腱的牽引作用才能使肌肉的收縮帶動不同骨的運動。
每一塊骨骼肌都分成肌腹和肌腱兩部分,肌腹由肌纖維構成,色紅質軟,有收縮能力,肌腱由致密結締組織構成,色乳白較硬,沒有收縮能力。
肌腱把骨骼肌附著于骨骼。長肌的肌腱多呈圓索狀,闊肌的肌腱闊而薄,呈膜狀,又叫腱膜。此處的肌腹即為通常所說的紅肌,而肌腱即為白肌,分別控制肌肉的力量、爆發(fā)力和耐力。肌腱干細胞(T SC s) 是一種來源于肌腱組織的間充質干細胞,其具有多向分化潛能,并且在外源性前列腺素E2作用下異常分化。
體外培養(yǎng)時該細胞群具有克隆形成能力、自我更新及多向分化潛能等干細胞的普遍特性。肌腱干細胞可以被誘導向脂肪細胞、軟骨樣細胞、骨細胞分化。
在裸鼠模型中,肌腱干細胞還可以形成肌腱樣組織,軟骨樣組織以及腱-骨連接樣組織等。相比骨髓間充質干細胞而言,T SC s具有更好的克隆形成能力和增殖能力,軟骨相關基因和肌腱相關基因表達更高,具有更好的成骨、成脂和成軟骨能力,因此可以作為組織工程中的種子細胞。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的兔肌腱干細胞采用膠原酶、中性蛋白酶混合消化法并通過肌腱干細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的兔肌腱干細胞經(jīng)C D 44免疫熒光鑒定,純度可達90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
培 養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態(tài) :成纖維細胞樣
傳代特性 :可傳5代左右。3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%
兔肌腱干細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
使用方法
兔肌腱干細胞是一種貼壁細胞,細胞形態(tài)呈成纖維細胞樣,在通蔚生物技術部標準操作流程下,細胞可傳5代左右。3代以內(nèi)狀態(tài)最佳。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T 25細胞培養(yǎng)瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0. 1m g/m l),明膠(0. 1% ),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。