產品簡介
產品名稱 :大鼠神經小膠質細胞
產品品牌 :通蔚生物
組織來源 :腦組織
產品規格 :5×105cells/T 25細胞培養瓶
細胞簡介
大鼠神經小膠質細胞分離自腦組織。大腦分左右兩個半球,大腦皮質(灰質) 覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面,即外側面(約占整個皮質面積的1/3) 、內側面和底面(占2/3的面積) 。半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積。大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。
由于三溝裂之界隔,使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。小膠質細胞是神經膠質細胞的一種,相當于腦和脊髓中的巨噬細胞,是中樞神經系統(C N S) 中的第一道也是最主要的一道免疫防線。小膠質細胞大約占大腦中的神經膠質細胞的20% ,小膠質細胞不停地清除著中樞神經系統中的損壞的神經,斑塊及感染性物質。無數臨床上和神經病理學研究表明激活的小膠質細胞在神經退化類疾病的發病機理中起到十分重要的作用,如帕金森病、多發性硬化和阿茲海默癥等。
但是過多激活或失控的小膠質細胞會引起神經毒性。它們是促炎因子和氧化應激的重要來源,如腫瘤壞死因子(T N F) ,一氧化氮,白介素等有神經毒性的物質。
神經小膠質細胞的主要功能:
① 神經膠質出現在大腦發育早期向成熟階段轉化的過程中。
② 當程序性細胞死亡時,或在大腦發育的過程中,中樞神經系統受損或受到病理損壞時,神經膠質可做為大腦的巨噬細胞。
③ 膠質細胞能在Ⅱ類組織相容性復合體表達C D -4陽性T細胞時表達抗原,能進行Fc介導的巨噬作用,并且與造血細胞和巨噬細胞組織共享抗原。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的大鼠神經小膠質細胞采用酶消化法結合差速貼壁法,在培養基營養缺失數天后經搖床震蕩收集脫落細胞制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶 。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的大鼠神經小膠質細胞經C D 11b免疫熒光鑒定,純度可達90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
培 養 基 :含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態 :梭形、多角形
傳代特性 :屬于終末分化細胞。屬于不增殖細胞群
傳代比例 :不傳代
消 化 液 :利多卡因(12m M )
培養條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%
大鼠神經小膠質細胞體外培養周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
大鼠神經小膠質細胞是一種貼壁細胞,細胞形態呈梭形、多角形,在通蔚生物技術部標準操作流程下,細胞屬于終末分化細胞。屬于不增殖細胞群。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T 25細胞培養瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2. 特殊細胞消化一
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加利多卡因(12m M ) 消化液1m L至培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,37℃溫浴3min(不能超過5min) 。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5m l完全培養基稀釋消化液。
3) 用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞,吸出細胞懸液,經1200rpm 離心5min,丟棄上清。
4) 用完全培養基重懸細胞,計數接種于相應實驗器具內,待細胞完全貼壁后開始試驗(預計2h 貼壁,12-24h 完全展開) 。
5) 待細胞完全貼壁后,培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 特殊細胞消化二
1) 若細胞無法消化,更換消化液為0. 25% 胰蛋白酶,按照上述消化一方案操作。
2) 若仍然無法消化,加入3ml完全培養基終止消化,采用無菌細胞刮,直接刮取細胞(此法不推薦,最后選擇,會造成細胞機械損傷死亡) 。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。