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豬雪旺氏細胞
產品簡介
產品名稱 ：豬雪旺氏細胞
產品品牌 ：通蔚生物
組織來源 ：神經組織
產品規(guī)格 ：5×105cells/T 25細胞培養(yǎng)瓶
細胞簡介
豬雪旺氏細胞分離神經組織。周圍神經系統中的神經膠質細胞稱施萬（schwann，又名雪旺細胞）細胞，它沿神經元的突起分布。施萬細胞包裹在神經纖維上，這種神經纖維叫有髓神經纖維。有髓神經纖維和無髓神經纖維的施萬細胞的形態(tài)和功能有所差異，施萬細胞的外表面有基膜，能分泌神經營養(yǎng)因子，促進受損的神經元的存活及其軸突的再生，參與周圍神經系統中神經纖維的構成。
施萬細胞的胞核呈長卵圓形，其長軸與軸突平行，核周有少量胞質。由于施萬細胞包在軸突的外面，故又稱神經膜細胞（neurilemmalcell），它的外面包有一層基膜。施萬細胞最外面的一層胞膜與基膜一起往往又稱神經膜（neurilem m a），光鏡下可見此膜。在有髓神經纖維發(fā)生中，伴隨軸突一起生長的施萬細胞表面凹陷成一縱溝，軸突位于縱溝內，溝緣的胞膜相貼形成軸突系膜（m esaxon）。
軸突系膜不斷伸長并反復包卷軸突，把胞質擠至細胞的內、外邊緣及兩端（即靠近郎氏結處），從而形成許多同心圓的螺旋膜板層，即為髓鞘。故髓鞘乃成自施萬細胞的胞膜，屬施萬細胞的一部分。施萬細胞的胞質除見于細胞的外、內邊緣和兩端外，還見于髓鞘板層內的施－蘭
切跡。該切跡構成螺旋形的胞質通道，并與細胞外、內邊緣的胞質相通。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的豬雪旺氏細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的豬雪旺氏細胞經S-100免疫熒光鑒定，純度可達90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
培 養(yǎng) 基 ：含FBS、bFG F、Insulin、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：貼壁
細胞形態(tài) ：雙極、多極形
傳代特性 ：可傳1-2代
傳代比例 ：1:2
消 化 液 ：0. 25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 ：氣相：空氣，95% 。C O2，5%
豬雪旺氏細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
使用方法
豬雪旺氏細胞是一種貼壁細胞，細胞形態(tài)呈雙極、多極形，在通蔚生物技術部標準操作流程下，細胞可傳1-2代。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T 25細胞培養(yǎng)瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1）吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次。
2）添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1min。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化。
3）用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至
5m L，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4）待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 復蘇操作說明
1. 準備好37度水浴鍋，預熱至37度。
2. 準備好T25培養(yǎng)瓶，加入10ml完全培養(yǎng)基（培養(yǎng)基量必須大于凍存液10倍體積）。
3. 取出干冰內凍存細胞管，用EP手套包裹凍存管（防止管內進水導致污染），迅速放于水
浴鍋內，于1min內融化完全。
4. 取出凍存管，酒精噴灑消毒后擦干，置于超凈臺內。
5. 吸取凍存管內細胞懸液，加入步驟2中準備好的T25培養(yǎng)瓶內，8字緩慢搖勻。
6. 培養(yǎng)瓶放于37度C O 2恒溫培養(yǎng)箱內，靜置培養(yǎng)24h，更換新鮮換培養(yǎng)基（注意貼壁細胞、懸浮細胞不同換液操作方法）。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0. 1m g/m l），明膠（0. 1% ），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
