犬臍帶間充質(zhì)干細胞
產(chǎn)品簡介
產(chǎn)品名稱 :犬臍帶間充質(zhì)干細胞
產(chǎn)品品牌 :通蔚生物
組織來源 :臍帶組織
產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T 25細胞培養(yǎng)瓶
細胞簡介
犬臍帶間充質(zhì)干細胞分離自臍帶。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu)。原來是由羊膜包卷著卵黃囊和尿膜的柄狀伸長部而形成的。
臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。當卵黃囊及其血管退化,臍動脈和臍靜脈就發(fā)達起來,在這些間隙中可以看到疏松的膠狀的間充質(zhì)。
在子宮中,子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管,與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近,在此處母體和胎兒的血液間進行C O 2和O 2,代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動脈將胎兒來的廢物運送至胎盤,臍靜脈將O 2和營養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運送給胎兒。最后由子宮靜脈將來自胎兒的代謝廢物運走,某種激素和抗體等也通過臍帶從母體移交給胎兒。
臍帶中含有大量的干細胞,干細胞是生命的種子,它會分化成機體的各種細胞,結(jié)出各種不同的果實——血液細胞、神經(jīng)細胞、骨骼細胞等。
干細胞是具有自我更新、高度增殖和多項分化潛能的細胞群體。這些細胞可以通過分裂維持自身細胞的特性和數(shù)量,又可進一步分化為各種組織細胞,從而在組織修復等方面發(fā)揮積極作用。
間充質(zhì)干細胞(M SC )是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細胞。在不同的誘導條件下,可分化為多種造血細胞以外的組織細胞,并具有造血支持、免疫調(diào)節(jié)、組織修復等作用。目前,多用于風濕免疫疾病的治療。
間充質(zhì)干細胞(M SC s)是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細胞,存在于骨髓、
脂肪組織、臍血及多種胎兒組織。
它可分泌多種細胞因子及生長因子,促進造血干細胞(H SC )的增殖與分化。M SC s還具有免疫調(diào)節(jié)、抗炎和組織修復作用,可減輕移植物抗宿主病(G V H D)及其他移植相關(guān)并發(fā)癥。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的犬臍帶間充質(zhì)干細胞采用組織貼塊法制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。
質(zhì)量檢測
通蔚生物實驗室分離的犬臍帶間充質(zhì)干細胞經(jīng)C D 90免疫熒光鑒定,純度可達90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
培 養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS、EG F、bFG F、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態(tài) :成纖維細胞樣
傳代特性 :可傳3-5代左右
傳代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%
犬臍帶間充質(zhì)干細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
使用方法
犬臍帶間充質(zhì)干細胞是一種貼壁細胞,細胞形態(tài)呈成纖維細胞樣,在通蔚生物技術(shù)部標準操作流程下,細胞可傳3-5代左右。建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T 25細胞培養(yǎng)瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
2)添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化。
3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至
5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4)待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0. 1m g/m l),明膠(0. 1% ),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和通蔚生物技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。