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產(chǎn)品簡介
產(chǎn)品名稱 ：大鼠淋巴管內(nèi)皮細胞
產(chǎn)品品牌 ：通蔚生物
組織來源 ：淋巴管
產(chǎn)品規(guī)格 ：5×105cells/T 25細胞培養(yǎng)瓶
細胞簡介
大鼠淋巴管內(nèi)皮細胞分離自淋巴管組織。淋巴管由毛細淋巴管匯合而成。其形態(tài)結構與靜脈相似，但管徑較細，管壁較薄，瓣膜較多且發(fā)達，外形呈串珠狀。淋巴管根據(jù)其位置分為淺、深二種。它們管位于皮下，常與淺靜脈伴行，收集皮膚和皮下組織的淋巴。深淋巴管與深部血管伴行，收集肌肉和內(nèi)臟的淋巴。
淺、深淋巴管之間有廣泛的交通支。淋巴管在向心行程中，通常經(jīng)過一個或多個淋巴結，從而把淋巴細胞帶入淋巴液。主要功能是濾過淋巴液，產(chǎn)生淋巴細胞和漿細胞，參與機體的免疫反應。當局部感染時，細菌、病毒或癌細胞等可沿淋巴管侵入，引起局部淋巴結腫大。
如該淋巴結不能阻止和消滅它們，則病變可沿淋巴管的流注方向擴散和轉(zhuǎn)移。淋巴管內(nèi)皮細胞(LE C ) 是襯覆于淋巴管內(nèi)表面的一種單層扁平上皮，是構成淋巴管壁的主要結構，參與維持體液平衡，調(diào)節(jié)淋巴細胞再循環(huán)和機體的免疫反應和組織液及蛋白質(zhì)的運輸，在疾病過程中也起著重要作用。
近年研究表明，LEC還在傷口愈合、淋巴管水腫和炎癥擴散等病理過程中起重要作用，而且與腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關。
淋巴管內(nèi)皮細胞主要功能：
① 調(diào)節(jié)體液、蛋白和組織壓力平衡。
② 為免疫系統(tǒng)的重要組成部分。
淋巴管內(nèi)皮細胞與主要病生理變化：
① 囊腫型淋巴管瘤。
② 淋巴管炎。
③ 淋巴結核。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的大鼠淋巴管內(nèi)皮細胞采用中性蛋白酶消化法結合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶 。
質(zhì)量檢測
通蔚生物實驗室分離的大鼠淋巴管內(nèi)皮細胞經(jīng)V EG FR 3免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
包被條件 ：PLL(0. 1m g/ml) ，明膠(0. 1%)
培 養(yǎng) 基 ：含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：貼壁
細胞形態(tài) ：內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 ：可傳1-2代
傳代比例 ：1:2
消 化 液 ：0. 25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 ：氣相 ：空氣，95% 。C O2，5%
大鼠淋巴管內(nèi)皮細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
使用方法
大鼠淋巴管內(nèi)皮細胞是一種貼壁細胞，細胞形態(tài)呈內(nèi)皮細胞樣，在通蔚生物技術部標準操作流程下，細胞可傳1-2代。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T 25細胞培養(yǎng)瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0. 1m g/m l），明膠（0. 1% ），依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
