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產品簡介
產品名稱 ：大鼠胰腺星狀細胞
產品品牌 ：通蔚生物
組織來源 ：胰腺組織
產品規格 ：5×105cells/T 25細胞培養瓶
細胞簡介
大鼠胰腺星狀細胞分離自胰腺組織。胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氫鈉、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通過胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質、脂肪和糖的作用。
內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成，胰島主要由4種細胞組成：α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素，升高血糖。β細胞分泌胰島素，降低血糖。γ細胞分泌生長抑素，以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌。PP細胞分泌胰多肽，抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。
纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征，活化的胰腺星狀細胞(PSC ) 是胰腺纖維化的主要效應細胞，PSC 分離和成功培養是體外研究胰腺纖維化的重要前提。未活性化的PSC 胞漿中富含維A 脂滴，并表達D esmin蛋白，活化后的PSC則表達α-平滑肌肌動蛋白(alp h a-SM A ) 。
PSC 具有靜息態與激活態兩種，并分別具有特異的標志物。靜息狀態PSC 胞質內富含的維生素A 脂滴可以被油紅O 染成紅色，陽性表達D esmin。激活狀態PSC 陽性表達alp h a-SM A 。油紅O 染色發現，原代分離的細胞培養6d，胞漿中仍可見明顯的脂滴，傳代后，橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失。
免疫細胞化學染色顯示，細胞接種24h仍然表達D esmin，48h后D esmin基本不再表達。培養48h后絕大多數細胞開始表達alp h a-SM A，隨著培養時間的增長和傳代次數的增加，細胞表達alp h a-SM A，而不再表達D esmin，說明細胞活化。提示PSC接種24h后即啟動了激活過程，至培養第6d大多數細胞激活，傳代后細胞處于高度激活狀態。
原代胰腺星狀細胞可作為慢性胰腺炎新藥的細胞篩選模型，目前研究發現：胰腺受損時，在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細胞活化，導致細胞形態、功能發生變化，促使基質增生、膠原蛋白的大量生成及不規則沉積。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的大鼠胰腺星狀細胞采用膠原酶制備而來，細胞總量約為5×10 5cells/瓶。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的大鼠胰腺星狀細胞經α-SM A、D esmin免疫熒光鑒定，純度可達90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
培 養 基 ：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：貼壁
細胞形態 ：成纖維細胞樣
傳代特性 ：可傳2-3代
傳代比例 ：1:2
消 化 液 ：0. 25% 胰蛋白酶
培養條件 ：氣相 ：空氣，95% 。C O2，5%
大鼠胰腺星狀細胞體外培養周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
大鼠胰腺星狀細胞是一種貼壁細胞，細胞形態呈成纖維細胞樣，在通蔚生物技術部標準操作流程下，細胞可傳2-3代。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T 25細胞培養瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5m L，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞完全貼壁后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0. 1m g/m l），明膠（0. 1% ），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
