基本信息
產品品牌 :通蔚生物
中文名稱 :大鼠肺泡巨噬細胞
細胞簡稱 :N R8383 [A gC 11x3A;N R8383.1]
細胞別稱 :N R-8383;NR 8383;N R8383.1;A gC 11x3A;Norm alR at,A ugust3,1983
細胞形態 :巨噬細胞樣
生長特性 :半貼半懸
培養環境 :空氣,95% ;CO2,5% 37℃
凍存條件 :55% 基礎培養基+40% FBS+5% D M SO液氮
完全培養基 :Ham'sF-12K (PM 150910)+20% F B S(164210-50)+1% P /S(P B 180120)
傳代步驟
1、該細胞為半貼壁半懸浮細胞,懸浮細胞是活細胞,可用離心管收集細胞懸液后,于1200 rpm (250g左右)離心收集細胞。
2、部分貼壁不牢的細胞可直接吹起使之懸浮。
3、貼壁較牢固的細胞可用PBS潤洗后,在培養瓶中加入1~2毫升0.25% 胰蛋白酶溶液(含ED T A )置于 37℃培養箱中消化,待細胞變圓收縮后可用4~ 6 m L左右完全培養基進行終止消化,輕輕吹散細胞后離心搜集細胞。
4、將懸浮的細胞和貼壁的細胞收集到一起混勻后按比例接種到新的培養瓶。
傳代比例(密度) :2×10^ 5-5×10^ 5cells/m L
換液頻次 :2~ 3次/周
細胞背景描述
N R 8383細胞來源于肺灌洗時的正常大鼠肺泡巨噬細胞,N R 8383細胞在G erbil肺細胞連續培養液存在下培養了8-9個月。隨后,N R 8383細胞不再需要外源生長因子。通過有限稀釋法,從單個細胞克隆并亞克隆N R 8383細胞,并3次用軟瓊脂亞克隆。N R 8383細胞表現出巨噬細胞的特性:吞噬酵母多糖和銅綠、非特異性脂酶活性、Fc受體、氧化降解;分泌IL-1、T N F beta和IL-6,可重復地響應外源生長因子。N R 8383細胞響應博萊霉素,分泌TG F beta前體。N R 8383細胞在博萊霉素刺激下,TG F betam RN A 表達也上升。N R8383細胞對內毒素敏感,1-10n g/ml的LPS水平抑制增生達50% 。即使達到0.001m g/ml的水平,LPS抑制還是無毒且在后續過程中可逆的。N R 8383細胞提供了高響應的肺泡巨噬細胞的均一來源,可以用于體外研究巨噬細胞相關活性,此細胞懸浮-貼壁混合生長。
組織來源 :肺;巨噬細胞;肺泡
細胞類型 :自發永生化細胞
生物安全等級 :1
受體表達 :Fc
基因表達 :tran sfo rming grow th factorbeta(TG F beta);in terleukin 1 (IL-1);in terleukin6 (IL-6)
細胞保藏中心 :ATCC;C R L-2192
收到常溫細胞后如何處理
細胞培養詳細操作步驟請參照通蔚生物細胞培養操作指南
1.收到常溫細胞后,及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現象。
2.用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。先不要打開培養瓶蓋,將細
胞置于細胞培養箱內靜置培養2-4小時,以便穩定細胞狀態。
3.仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形態、所用
基礎培養基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4.靜置完成后,取出細胞培養瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(所拍照片 將作為后續服務
依據);建議細胞傳代培養后,定期拍照、記錄細胞生長狀態。
5.若觀察到異常或者對細胞有疑問,請及時跟我們聯系;對于細胞培養操作及培養。可跟我們的技術支持交流。