產(chǎn)品及特點(diǎn):
微量核酸污染導(dǎo)致的 PCR 假陽(yáng)性是廣大實(shí)驗(yàn)者最頭痛的問(wèn)題之一。為解決此難題,本公司開(kāi)發(fā)了本款 PCR 污染清除劑,本產(chǎn)品無(wú)毒、無(wú)腐蝕性,可將裸露的核酸完全降解至無(wú)法作為擴(kuò)增模板的小片段,且無(wú)法恢復(fù),從而徹底消除 PCR 過(guò)程中由于各種環(huán)境污染而導(dǎo)致的假陽(yáng)性擴(kuò)增。
本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 本產(chǎn)品為非酶類(lèi)試劑,所有組分可生物降解、無(wú)毒無(wú)害。不含有機(jī)溶劑或者揮發(fā)性物質(zhì),不含無(wú)機(jī)酸或者堿性物質(zhì),不會(huì)對(duì)金屬形成腐蝕。
2. 產(chǎn)品中各組分協(xié)同作用,快速、非序列特異性的降解核酸污染。15 分鐘的處理可以使 ug 級(jí)別的 DNA 失去擴(kuò)增性,不會(huì)對(duì)后續(xù) PCR 或其他擴(kuò)增產(chǎn)生污染。
3. 使用簡(jiǎn)單,操作方便。噴灑或浸泡處理 15 分鐘即可完成清除作用。
4. 可廣泛用于清除實(shí)驗(yàn)操作臺(tái)、儀器、塑料和玻璃器皿、移液器、解剖刀、鑷子、手套等各種實(shí)驗(yàn)器材表面的 DNA 污染。
5. 與傳統(tǒng)的 PCR 污染清除方法,如:稀酸處理法、紫外照射法、尿嘧啶糖苷酶(UNG)法和酶解變性等相比,本產(chǎn)品具有能徹底破壞 DNA 分子、有效清除小片段核酸等優(yōu)點(diǎn)。規(guī)格及成分 成 份 編 號(hào) 250 mL 大扁盒包裝
運(yùn)輸及保存:常溫運(yùn)輸和保存,有效期兩年
自備試劑:蒸餾水
使用方法:
注 意:以下操作均需要戴手套進(jìn)行。本產(chǎn)品可重復(fù)使用 5-10 次,使用后建議密封保存。
工作平臺(tái)的清潔:直接將本產(chǎn)品噴于臺(tái)面,最少 15 分鐘后用普通吸水紙擦凈,最后用吸水紙擦凈,晾干。本產(chǎn)品為不會(huì)污染環(huán)境,吸水紙可以放入垃圾袋。
實(shí)驗(yàn)儀器的清潔:用浸有本產(chǎn)品的紙擦拭儀器表面,再用吸水紙擦凈,晾干。用本產(chǎn)品處理金屬器械的時(shí)間不能超過(guò) 15 分鐘。本產(chǎn)品為不會(huì)污染環(huán)境,可以直接倒入下水道。
移液槍的清潔:根據(jù)生產(chǎn)廠家的使用手卸下移液槍的前端,留下接口塞和圈套后將其浸放在本產(chǎn)品中最少 15 分鐘,再用蒸餾水徹底沖洗后,晾干,裝回移液槍。本產(chǎn)品為不會(huì)污染環(huán)境,可以直接倒入下水道。
塑料離心管和滴頭的清潔: 將反應(yīng)塑料離心管和滴頭充分浸泡在本產(chǎn)品中最少 15 分鐘以上(最好不要有氣泡), 然后蒸餾水充分浸泡兩次,試管或離心管可立即使用或干燥后備用。本產(chǎn)品為不會(huì)污染環(huán)境,可以直接倒入下水道。
瓊脂糖凝膠的清潔:將含 DNA 的凝膠充分浸泡在本產(chǎn)品中最少 15 分鐘以上(最好不要有氣泡),然后丟棄凝膠。本產(chǎn)品為不會(huì)污染環(huán)境,可以直接倒入下水道。
玻璃和塑料器皿的清潔:將器皿浸泡在本產(chǎn)品中,靜置處理最少 15 分鐘后取出,再用蒸餾水浸泡二次以上,倒立晾干后備用。本產(chǎn)品為不會(huì)污染環(huán)境,可以直接倒入下水道。
附件:如何檢測(cè)本產(chǎn)品滅活 DNA 的效果
1、將 ug 級(jí)別的 DNA(質(zhì)粒或 PCR 產(chǎn)物)跟本產(chǎn)品 1:1 體積比混合,用 DNA:水 1:1 作為對(duì)照。(如果 DNA 有 20uL,則加入本產(chǎn)品 20uL)。
2、室溫放置 15 分鐘。
3、各加入等體積的 0.6M 乙酸鈉,pH5.2,混勻。(如果樣品為 40uL,則加入40uL 的 0.6M 乙酸鈉,pH5.2)
4、各加入 2 倍體積的無(wú)水乙醇。
5、12000rpm RT 離心 15 分鐘,小心棄上清。
6、在沉淀中加入 1mL 75%乙醇,12000rpm RT 離心 15 分鐘,小心棄上清。
7、短暫離心,棄上清。
8、用 TE 緩沖液溶解沉淀,TE 的體積最好跟樣品的初始體積一樣。然后把 2 管樣品稀釋不同的濃度進(jìn)行 PCR 對(duì)比試驗(yàn)。