Ehrlich蘇木素染色液
摘要
屬于常規切片HE染色的明礬蘇木素的一種,尤其適用于教學和科研上的核染色質染色,也可用于黏蛋白染色(如軟骨的黏多糖),推薦用于骨和軟骨的染色。
產品介紹
Ehrlich蘇木素染色液
產品簡介:
蘇木素
(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯合染色簡稱HE染色,是病理學和組織學很常用的一種染色方法。蘇木 精為堿性天 然染料,可使細胞核著色。細胞核內染色質的主要成分是DNA,在DNA的雙螺旋結構中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使DNA雙螺旋的外側帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木 精堿性染料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木素成熟的方法有自然氧化法、化學氧化法。自然氧化是指暴露于光和空氣中,這個過程比較緩慢,約需3~6個月不等,但生成物染色能力可維持很長時間。Ehrlich和Delafield蘇木素就屬于這種。Ehrlich蘇木素作為一種良好的核染色液,也可用于黏蛋白染色如軟骨的黏液多糖,骨和軟骨的染色也推薦使用Ehrlich蘇木素染液。
Ehrlich蘇木素染液非常穩定,成熟后密封可保存2年。對核染色質染得很清晰細致,染色時間也稍長,約15~20min。適用于教學和科研上的制片染色,用此染色液對冷凍切片染色則不理想。
染色原理:
細胞核染色的原理:
蘇木素為堿性天 然染料,可使細胞核著色。細胞核內染色質的成分主要是
DNA,在DNA雙螺旋結構中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使DNA雙螺旋的外側帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色。
細胞漿染色的原理:
伊紅是一種化學合成的酸性染料,在一 定條件下可使細胞漿著色。細胞漿的主要成分是蛋白質,為兩性化合物,細胞漿的染色與染液的
pH值密切相關。當染色液pH值在胞漿蛋白質等電點(4.7~5.0)以下時,胞漿蛋白質以堿式電離,則細胞漿帶正電荷,就可被帶負電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負電荷的陰離子,與胞漿蛋白質帶正電荷的陽離子結合,使細胞漿著色,呈現紅色。
分化作用:
染色后,用某些特定的溶液將組織過多結合的染色劑脫去,這個過程稱為分化作用,所用的溶液稱為分化液。在
HE染色中常用1%鹽酸乙醇作為分化液,因酸能破壞蘇木素的醌型結構,使組織與色素分離而退色。大多數組織經蘇木素染色后,必須用1%鹽酸乙醇分化,使細胞核過多結合的蘇木素染料和細胞漿吸附的蘇木素染料脫去,再進行伊紅染色,才能保證細胞核與細胞漿染色的分明。
返藍作用:
分化之后,蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態,呈紅色;在堿性條件下處于藍色離子狀態,呈藍色。組織切片經酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色,立即用水除去組織切片上的酸而中止分化,再用弱堿性水使蘇木素染上的細胞核呈現藍色,這個過程稱為返藍作用或藍化作用。另外用自來水浸洗也可使細胞核返藍,但所需時間較長。