改良Lillie-Mayer蘇木素染色液
摘要
常規(guī)組織切片HE染色
產(chǎn)品介紹
改良Lillie-Mayer蘇木素染色液
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
蘇木素
(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯(lián)合染色簡(jiǎn)稱HE染色,是病理學(xué)和組織學(xué)很常用的一種染色方法。蘇木 精為堿性天 然染料,可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的主要成分是DNA,在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木 精堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。
改良
Lillie-Mayer蘇木素染色液無(wú)毒,無(wú)氧化膜,細(xì)胞核染色質(zhì)著色深而細(xì)微,臨床上常替代Harris蘇木素染色液。對(duì)細(xì)胞核染色很清晰,不著染胞質(zhì)和纖維成分,屬進(jìn)行性染色,故染色后可以不用鹽酸乙醇分化,染色時(shí)間約5~8min,如果是充分氧化后可染色3~5min。常用于糖原等特染、酶組化和免疫組化等染色后復(fù)染細(xì)胞核作對(duì)照染色,尤其適用于經(jīng)過(guò)特殊染色后不能經(jīng)酸處理時(shí)對(duì)細(xì)胞核的復(fù)染。在特殊染色中,常與天青石藍(lán)B液聯(lián)合染色,使細(xì)胞核染色后不被后續(xù)的酸性染料所褪色。
染色原理:
細(xì)胞核染色的原理:
蘇木素為堿性天 然染料,可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是
DNA,在DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍(lán)色,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。
細(xì)胞漿染色的原理:
伊紅是一種化學(xué)合成的酸性染料,在一 定條件下可使細(xì)胞漿著色。細(xì)胞漿的主要成分是蛋白質(zhì),為兩性化合物,細(xì)胞漿的染色與染液的
pH值密切相關(guān)。當(dāng)染色液pH值在胞漿蛋白質(zhì)等電點(diǎn)(4.7~5.0)以下時(shí),胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離,則細(xì)胞漿帶正電荷,就可被帶負(fù)電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,與胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽(yáng)離子結(jié)合,使細(xì)胞漿著色,呈現(xiàn)紅色。
分化作用:
染色后,用某些特定的溶液將組織過(guò)多結(jié)合的染色劑脫去,這個(gè)過(guò)程稱為分化作用,所用的溶液稱為分化液。在
HE染色中常用1%鹽酸乙醇作為分化液,因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu),使組織與色素分離而退色。大多數(shù)組織經(jīng)蘇木素染色后,必須用1%鹽酸乙醇分化,使細(xì)胞核過(guò)多結(jié)合的蘇木素染料和細(xì)胞漿吸附的蘇木素染料脫去,再進(jìn)行伊紅染色,才能保證細(xì)胞核與細(xì)胞漿染色的分明。
返藍(lán)作用:
分化之后,蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),呈紅色;在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài),呈藍(lán)色。組織切片經(jīng)酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色,立即用水除去組織切片上的酸而中止分化,再用弱堿性水使蘇木素染上的細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色,這個(gè)過(guò)程稱為返藍(lán)作用或藍(lán)化作用。另外用自來(lái)水浸洗也可使細(xì)胞核返藍(lán),但所需時(shí)間較長(zhǎng)。