中文名稱 : T4 DNA聚合酶
英文名稱 : T4 DNA Polymerase
C A S : 9012-90-2
分子量 : 104kDa,單體
級 別 : BR
來 源 : 含有T4噬菌體克隆基因43的大腸桿菌
濃 度 : 5~10u/ul
活性定義 : 是指在37℃、30分鐘內將10nmol脫氧核糖核苷酸摻入多聚核苷酸片段(吸附在DE-81上)所需的酶量
酶活性分析混合物 : 67mM Tris-HCL(PH8.8), 1mM DTT, 6.7mM MgCL2, 16.7mM (NH4)2SO4, 0.2mg/ml BSA, 0.033mM各種dNTP,dGTP, 0.4MBq/ML(3H).-dTTP和0.2mM熱變性和核酸酶處理的牛胸腺DNA
保存緩沖液組分 : 20mM 磷酸鉀(PH7.5), 200mM KC1, 20mM DTT和50%(v/v)甘油
5×反應緩沖液 : 335mM Tris-HCL(PH8.8,25℃), 33mM MgCL2, 5mM DTT, 84mM (NH4)2SO4
抑制劑 : 金屬螯合劑,核苷酸類似物2(p-n-butylanilino)-dATP、N2-(p-n-burylanilino)-dGTP、SH-封閉混合物
失 活 : 75℃加熱10分鐘
質量控制 : 測試表明無內切脫氧核糖核酸酶污染
性 狀 : 懸浮液。重組酶,在模板及引物存在的條件下,T4 DNA聚合酶催化沿5'→3'方向DNA的合成。本酶還具有3'→5'外切核酸酶的活性,該活性比DNA聚合酶I強。T4 DNA聚合酶不像大腸桿菌DNA 聚合酶 I,不具有5'→3' 外切核酸酶的活性。
用 途 : 生化研究。3'突出末端平滑化;5'突出末端補平;單鏈刪除后亞克隆;基因定位突變中的第二條鏈的合成;通過置換合成法(replacement synthesis)對DNA探針進行標記。
保 存 : -20℃