中文名稱 : PUC18
其他中文名稱 : PUC18質粒
級 別 : BR
濃 度 : 450ug/ml
性 狀 : 液體或粉末。pUC18是適合于雙脫氧法DNA測序的載體,通常運用于重組dna的分子克隆中,首先我們制備大腸桿菌的感受態細胞(能接受外來重組的dna),這種感受態菌株必須不同外來DNA分子發生遺傳重組,通常是rec基因缺陷型的突變體,同時它們必須是限制系統缺陷或限制與修飾系統均缺陷的菌株,即具有具有這三種缺陷(rk mk rec ),同時對氨芐青霉素敏感(ap)。puc18載體自身帶有抗氨芐青霉素基因,而外源片段不具有,這樣只有帶有puc18的轉化子的菌株才能在氨芐青霉素平板上存活,而外源片段自身環化的不能存活,這稱為抗性篩選。pUC18 上帶有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的調控序列和β-半乳糖苷酶N 端146 個氨基酸的編碼序列,在這個編碼區中插有一個多克隆位點,且不影響正常功能,DH5α感受態菌株帶有β-半乳糖苷酶C 端部分序列的編碼信息,當puc18載體在正常情況下同感受態菌株融合后,互補表達具有酶活性的蛋白質,稱為α-互補現象,當有外源片段插入多克隆位點后,互補現象消失,其形成的菌株顏色具有很大的差異,很容易鑒別,這種篩選方法稱為α-互補現象篩選。由上可見,puc18載體除了能重組導入外源片段外,在篩選表達過程中還具有重要的作用
用 途 : 生化研究。克隆外源基因。利用lac promoter進行基因表達。使用M13 primers進行DNA測序。
保 存 : -20℃