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021-54845833/15800441009
產品及特點：
2019 新型冠狀病毒，即“SARS-CoV-2”，因 2019 年武漢病毒性肺炎病例而被發(fā)現(xiàn)，2020 年 1 月 12 日被世界衛(wèi)生組織命名。冠狀病毒是一個大型病毒家族，新型冠狀病毒是以前從未在人體中發(fā)現(xiàn)的冠狀病毒新毒株。人感染了冠狀病毒后常見體征有呼吸道癥狀、發(fā)熱、咳嗽、氣促和呼吸困難等。在較嚴重病例中，感染可導致肺炎、嚴重急性呼吸綜合征、腎衰竭，甚至死亡。
本產品根據 PCR 原理開發(fā)，用于體外定性檢測人鼻咽拭子、痰液及肺泡灌洗液中的新型冠狀病毒的 N 基因，僅作為應對 SARS-CoV-2 感染的肺炎疫情期間的體外診斷應急使用。在使用上應遵守《中國 CDC 新冠肺炎實驗室檢測技術指南》、《新型冠狀病毒感染的肺炎防控方案》等文件(現(xiàn)行版)的相關要求。可用于科研領域快速檢測 2019 新型冠狀病毒。
1. 一站式，用戶不需要單獨準備每種成分，包括引物和對照。
2. 根據冠狀病毒(新冠病毒)N基因的保守基因序列設計的引物，具有良好的特異性。
3. 靈敏度可以達到 1000 拷貝/反應。
4. 使用一管式 RT-PCR 技術，RT 和 PCR 兩步在一個試管內完成，不需要中間轉移樣品，降低了操作誤差和可能的污染。
5. 本產品足夠 50 次 20μL 體系的 RT-PCR。
6. 本產品只能用于科研，不能用于臨床。
規(guī)格及成分：
|
編號 |
成分 |
規(guī)格 |
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試劑一 |
5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer |
200 μL(橘黃蓋) |
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試劑二 |
MMLV-Taq Mix |
75 μL(紅蓋) |
|
試劑三 |
超純水 |
1 mL(亮黃蓋) |
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試劑四 |
冠狀病毒(新冠病毒)N基因 RT-PCR 引物混合液 |
100 μL(白蓋) |
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試劑五 |
冠狀病毒(新冠病毒)N基因 RT-PCR 陽性對照(1×10E8 /μL) |
50 μL(黃蓋) |
|
試劑六 |
使用手冊 |
1 份 |
運輸及保存：
低溫運輸，-20℃保存，保存期限為 12 個月。收到貨后陽性對照需要跟其他成分分開放置，因為其容易污染其他成分，造成假陽性。
自備試劑：
樣品 RNA。
使用方法：
一、樣品 DNA 的制備：
1. 如果有 N 個樣品，必須設置 N+2 個提取，多出的一個是 PC(樣品制備陽性對照)，一個是NC(樣品制備陰性對照)。可以用 10μL 冠狀病毒(新冠病毒)N基因 PCR陽性對照的 1000 倍稀釋液作為制備的陽性對照。可以用水作為制備的陰性對照。制備所得成為樣品 RNA。
2. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 RNA，本試劑盒跟市場上大多數病毒 RNA 提取試劑盒兼容。可以選購本公司的柱式病毒 RNAout。
二、設置RT- PCR 反應(20μL 體系)：
3. 如果有 N+2 個樣品，則標記 N+4 個 PCR 管(額外增加的兩個管一個是RT-PCR 陽性對照，另一個是 RT-PCR 陰性對照)并按照下表在 PCR 管中加入下列成分：
|
成份 |
N+2 個 樣品管 |
RT-PCR 陰性對照 |
RT-PCR 陽性對照 |
|
5×雙酶一管式RT-PCR Buffer |
各 4 μL |
4 μL |
4 μL |
|
冠狀病毒(新冠病毒)N基因 RT-PCR 引物混合液 |
各 2 μL |
2μL |
2μL |
|
N+2 個制備的 RNA 樣品 |
各 12.5μL |
-- |
-- |
|
超純水 |
-- |
12.5μL |
-- |
|
冠狀病毒(新冠病毒)N基因 RT-PCR 陽性對照的 1000倍稀釋液 |
-- |
-- |
12.5μL |
|
MMLV-Taq Mix |
1.5 μL |
1.5 μL |
1.5 μL |
|
過程 |
溫度 |
時間 |
|
逆轉錄 |
42℃ |
30 min |
|
預變性 |
95℃ |
5 min |
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PCR 反應35個循環(huán) |
95℃ |
30 sec |
|
58℃ |
30 sec |
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|
72℃ |
20 sec |
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|
最后延伸 |
72℃ |
7 min |
5. 瓊脂糖電泳檢測擴增效果。如果陰性對照有擴增產物或陽性對照無擴增產物，則說明實驗失敗，需要分析實驗失敗的原因。只有在陰性對照沒有擴增產物、陽性對照必須有預期條帶出現(xiàn)，才有必要分析樣品的實驗結果，如果有預期片段大小的擴增產物則為陽性，如果無則為陰性。
四、特別提示：
本公司的所有產品，僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
