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021-54845833/15800441009
上海通蔚公司匯集了一批專業(yè)的細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)人員，所有細(xì)胞入庫之前均經(jīng)過嚴(yán)格的細(xì)胞質(zhì)量檢測(cè)和鑒定，所有細(xì)胞在出庫之前均經(jīng)過一次嚴(yán)格的質(zhì)檢認(rèn)證，確保細(xì)胞到每一位用戶手里都是最好狀態(tài)。
NCI-H838人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)：上皮樣
細(xì)胞數(shù)量：1×106個(gè)細(xì)胞數(shù)
細(xì)胞傳代：1：3傳代
細(xì)胞特性：該細(xì)胞于1984年建系源于一位59歲患有非小細(xì)胞肺癌的白人男性吸煙者從患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶分離而來
細(xì)胞純度：95％
細(xì)胞活力：87％（ViabilitybyTrypanBlueExclusion）
細(xì)胞檢測(cè)：細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
細(xì)胞凍存：液氮凍存（基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS）
細(xì)胞運(yùn)輸：干冰運(yùn)輸（1Vial）或活細(xì)胞運(yùn)輸（T-25flasks）
細(xì)胞用途：只可用于科研不可用于臨床診斷和治療
胞培養(yǎng)條件：
1、培養(yǎng)基：RPMI-1640培養(yǎng)基（不含Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗+800ng/ml Taxol
2、溫度：37.0°C
3、氣體:空氣 95%，CO2 5%
培養(yǎng)方法：
收到細(xì)胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況：
如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，留10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿（達(dá)80-90%）。即可進(jìn)行傳代，具體步驟如下：
a，棄去培養(yǎng)液，用PBS洗1-2次。
b，向瓶?jī)?nèi)加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓，迅速拿回操作臺(tái)，吸取胰蛋白酶，加含有6ml 含10%血清的培養(yǎng)液，輕輕吹打細(xì)胞。
c，加入等量的的培養(yǎng)液，輕輕吹打混勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)
d，傳代比例：1:2-1:3
溫馨提示：培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)液是加入最高藥物濃度的，為800ng/ml。我們采取緩慢增加藥物的梯度的方法。具體步驟是，首先加含200ng/mlTaxol藥物的培養(yǎng)液，放入培養(yǎng)箱，這段時(shí)間會(huì)有小部分細(xì)胞懸浮起來，屬于正常情況，通過換液可以去掉，等細(xì)胞待長(zhǎng)滿就可以消化傳代了，這時(shí)可以一直用含藥物培養(yǎng)液來消化培養(yǎng)細(xì)胞，一兩代之后就可以將藥物濃度提高到500ng/ml，兩代后可以將藥物濃度提高至最高水平800ng/ml，含藥物培養(yǎng)液用于細(xì)胞培養(yǎng)都沒有問題，凍存的時(shí)候就不要在凍存液里加藥物了。
保存和應(yīng)用：
客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。
復(fù)蘇的原則：
在實(shí)際操作中，凍存細(xì)胞要進(jìn)行復(fù)蘇，再培養(yǎng)傳代。復(fù)蘇細(xì)胞一般采用快速融化法。以保證細(xì)胞外結(jié)晶快速融化，以避免慢速融化水分滲入細(xì)胞內(nèi)，再次形成胞內(nèi)結(jié)晶損傷細(xì)胞。
如何選購優(yōu)質(zhì)的
NCI-H838人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
1）該細(xì)胞只能用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
2）收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
3）仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
4）用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常，請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力，請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
5）請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件;建議直接購買我司提供的完全培養(yǎng)基。
6）建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。
售后服務(wù)：
1)發(fā)貨時(shí)附：細(xì)胞實(shí)拍圖片兩張、細(xì)胞培養(yǎng)說明、細(xì)胞操作處理方法、細(xì)胞質(zhì)量問題反饋表等。
2）細(xì)胞污染問題，請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品48小時(shí)內(nèi)給我們真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果；細(xì)胞活性問題，請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品7天內(nèi)給我們真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，我們調(diào)查核實(shí)后予免費(fèi)調(diào)換，不收取任何費(fèi)用。
3）如用戶收到細(xì)胞8-15天之內(nèi)因處理不當(dāng)造成細(xì)胞死亡或污染，我公司將以6.5折優(yōu)惠價(jià)重新提供一株原細(xì)胞。
4）如用戶在16-30天內(nèi)因處理不當(dāng)造成細(xì)胞死亡或污染，我公司將以8折優(yōu)惠價(jià)重新提供一株原細(xì)胞。
